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BMSCs来源方便，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，免疫原性低。但是不同的分离培养方法使得BMSCs在体外扩增时的纯度、活性、表型和分化潜能差异很大，导致基础研究结论各异和临床试验效果不一。因此，深入认识BMSCs不同分离方法和培养条件的优缺点，并根据实验目的做出相应选择，是进行BMSCs实验研究的关键环节。目前用于分离BMSCs的方法主要有五种，分别是贴壁筛选法、骨组织消化法、密度梯度离心法、流式细胞仪分离法和磁珠分选法。下面就来教大家如何掌握这五种分离方法。

脊髓性肌萎缩症（SMA）是一种具高致亡性、致残性的罕见病，被称为两岁以下婴幼儿的头号遗传病杀手。绝大部分SMA患者（95%）是因SMN1基因第7号外显子纯合缺失所致病，另外5%患者的致病因也与这一基因的第7号外显子有关。今天的《Gene of the Week》就让我们一起了解SMA及其致病基因SMN1吧！运动神经元存活基因1（survival motor neuron gene 1, SMN1）编码与之同名的蛋白。该蛋白与人类遗传病脊髓性肌萎缩（Spinal Muscular Atrophy, SMA）密切相关，该疾病大多数情况下会导致新生儿2周岁之前死亡。SMN1的单拷贝失活（无症状）现象在亚洲人群中大约是1/50，这就造成了1/10000左右的新生儿发病率（不同人种地域的突变频率有所区别）。

此前已经有文章介绍过基因敲除实验的相关问题，但后面发现，相较于实验过程，很多研究者在方案设计初期就遇到了重重阻碍：目的基因转录本分析、gRNA 设计、转染方法、细胞克隆形成能力等等难题都在困扰着他们。如何才能设计出一个出色的基因敲除方案，有什么诀窍吗？诀窍就是这个超实用的工具——Smart-CRISPR™ 细胞基因编辑系统。只需输入基因及细胞株信息，即可获得细胞基因编辑设计方案，不要太出色。

南开大学领导的研究团队在《Advanced Science》杂志上发表题为“Targeted Repair of Vascular Injury by Adipose-Derived Stem Cells Modified with P-Selectin Binding Peptide”的论文，采用一种新颖的方法对脂肪来源的间充质干细胞进行修饰，从而实现血管损伤的靶向修复。

NASH在超重或肥胖的中年人群中比较常见，通常伴随着高血脂（胆固醇和甘油三酯水平升高）和糖尿病的出现。NASH发病机制复杂，目前还没有直接有效的药物，治疗方式主要是进行生活方式的干预，包括减轻体重、改变饮食、加强运动以及避免饮酒和服用不必要的药物等[1]。因此，建立可靠的动物模型对探索NASH的发病机制及治疗手段十分重要。

肿瘤免疫治疗无疑是全球抗肿瘤药物研究中最具发展前景的治疗方案之一。随着基于CAR-T、PD-1、PD-L1、CTLA-4等热门靶点的抗肿瘤创新药物的NDA获批，肿瘤免疫药物研发规模正在急速扩张，市场竞争不断加剧。如何加速肿瘤免疫药物的研发进展，提高临床试验的通过率？临床前开发起着至关重要的作用。尤其在疗效和安全性评估方面，合适的临床前动物试验为临床试验提供了可靠的数据支持。在此背景下，赛业有幸邀请到了世界各地的行业专家，来共同探讨免疫肿瘤学临床前研究所面临的挑战，并分享实践经验。

今天和大家见面的是Faah基因敲除小鼠。有研究通过将Faah基因外显子1及其上游约2kb的序列替换为PGK-neo元件来构建Faah敲除小鼠。对纯合敲除小鼠的脑和肝蛋白提取液进行Western blot分析，对脑切片进行免疫荧光分析，均显示编码蛋白缺失。Faah敲除小鼠（FAAH-/-）的脑和肝组织表现出大大降低的 FAAH 催化活性。

科研竞速赛道，干细胞选手也是屡创佳绩！脂肪来源的间充质干细胞（ADSC）作为冲刺高分文章的大热门选手，战绩骄人，硕果累累。@科研人，快来康康赛业OriCell®ADSC客户高分引用文献精选，助你实验一飞冲“添”，所向披靡！

基因点突变可以发生在基因组任意位置上，能对蛋白质的生物学功能、基因的网络调控机制等产生影响。今天我们就看一看在基因组上不同区域发生的点突变是如何影响基因的功能和产生突变表型的。点突变发生在功能蛋白的基因编码区中，这是我们所熟知的一种点突变的情况，能对多肽链中氨基酸序列产生影响。一般包括同义突变、错义突变、无义突变和终止密码突变。

8月3日，赛业生物受南方医科大学南方医院麻醉与围术期医学实验室盛情邀请，在南方医院新实验楼9楼大会议室开展了两场学术报告。此次学术报告，我们感受到了南方医科大学师生们的满满热情以及对我们产品和服务的肯定，感谢大家一直以来的信任和支持。作为模式动物领域的知名企业，赛业生物希望能为中国生物医药发展添砖加瓦，未来我们也希望积极整合资源与专业技术，推动健康和生命科学的发展进程，为构建人类命运共同体贡献智慧和力量。

解读文献是打好科研基础，练好内功的不二法门，没有章法通读文献，耗时耗力，精准阅读，有的放矢才能找准文章脉络。为此，赛业生物邀您参加CNS见系列活动之第一届文献解读大赛。博众家之长，让严密的逻辑在文字中翻飞，让严谨的科学在文献中迸发出闪亮的光，让新奇的解读打开新世界的大门。暑期宅家不如读paper，把逻辑、感触、想法、创意融于一体，参与文献解读大赛，更有大奖好礼送！

【线上讲座】基因编辑小鼠疾病模型在转化医学研究中的应用（北京中医药大学站）

今天我们要讲的主角是在非酒精性脂肪肝的发病过程中发挥重要作用的Sirt3基因。SIRT3通过调控线粒体功能参与全身性代谢稳态，目前研究初步揭示SIRT3在肝脏脂代谢和NAFLD疾病发展过程中的作用，这可能是一个临床治疗NAFLD的潜在分子靶标。在C57BL/6小鼠中敲除Sirt3基因后得到的Sirt3敲除小鼠在高脂饮食（HFD）诱导下表现出肝脏沉积更多的脂质，肝脏变性程度更高，总体的NAFLD进程更严重。

ESC具有什么形态学特征？它有哪些表面标志物？又该如何鉴定其分化潜能呢？请看以下分解。相对其他细胞，ESC单个细胞个体小，细胞核大，体外培养时呈集落样或克隆样生长，克隆内细胞排列紧密，细胞集落有明显的边界。此特有的形态学特征常用来做初步鉴定ESC的方法。例如，Mouse ESC细胞核大，胞核内有多个核仁，核浆比高。在贴壁生长的情况下，Human ESC集落与Mouse ESC不同，呈相对松散、扁平状集落，集落内细胞界限隐约可见。

近期，首都医科大学附属北京安贞医院杜杰/李玉琳教授团队在Circulation Research上发表了题为Variants of Focal Adhesion Scaffold Genes Cause Thoracic Aortic Aneurysm的研究论文，首次揭示了散发性iTAA基因突变的全景观，提出了一类新的TAA 致病基因，促进了对TAA遗传原因的理解。研究人员通过TesY249H基因敲入小鼠（赛业生物构建）和Tes敲除小鼠模型在体内证明TES 的功能及其在主动脉瘤发生中的作用。发现TesY249H基因敲入小鼠和Tes敲除小鼠的血管功能异常。

今天和大家见面的是高脂高胆固醇高果糖饮食诱导的NASH小鼠模型。给予动物高脂、高糖饲料喂养建立的脂肪肝模型，其主要发病机制是营养过剩，食物中脂类、胆固醇和（或）糖类过量，无法完全吸收利用，脂类堆积于肝而引发脂肪肝，进一步出现肝炎性改变及纤维化。该模型与人类非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）相似，是最常见的NAFLD动物模型。

上海交通大学医学院、上海口腔医学研究所研究人员在Advanced Science杂志发表的题为“A Magnesium-Enriched 3D Culture System that Mimics the Bone Development Microenvironment for Vascularized Bone Regeneration”的文章，发现了MagT1对血管化骨再生的特定作用，成功地构建了一个富镁3D培养系统，可以模拟骨发育微环境的血管化骨再生。

回顾上半年，赛业同样成绩斐然，赛业产品和技术服务已直接应用于包括CNS（Cell、Nature、Science）三大期刊在内的5240余篇学术论文，IF合计达20854分，文献被引用次数达25043次。赛业OriCell®提供的科研干细胞、细胞培养试剂和干细胞技术服务已帮助众多科研学者探索前沿奥秘，解决科研难题。作为细胞研究的科研工作者，不能不认识间充质干细胞（MSC）。间充质干细胞作为干细胞家族中的全能ACE担当，来源丰富，免疫原性低，收获了庞大的科研粉丝群，人气和实力不容小觑。我们来看看赛业OriCell®骨髓间充质干细胞及相关培养基如何为科研助力。

sgRNA在CRISPR-Cas9基因编辑系统中具有准确识别靶基因序列的作用，其效果可影响编辑的效率、是否发生脱靶等，甚至对最终基因编辑的效果产生决定性作用。因此，设计合理有效的sgRNA是我们实现基因编辑的重要基础。目前有较多提供gRNA设计的在线工具，常用的如张锋实验的CRISPOR（http://crispor.tefor.net/），只需输入目标序列，选定好种属基因组与相应的PAM，则可以得出多个gRNA，以及每个gRNA对应的特异性、切割效率和潜在脱靶位点，一般选择特异性、切割效率得分高的gRNA作后续实验（图4）。

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