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【线上讲座】基因编辑小鼠疾病模型在转化医学研究中的应用（北京中医药大学站）

今天我们要讲的主角是在非酒精性脂肪肝的发病过程中发挥重要作用的Sirt3基因。SIRT3通过调控线粒体功能参与全身性代谢稳态，目前研究初步揭示SIRT3在肝脏脂代谢和NAFLD疾病发展过程中的作用，这可能是一个临床治疗NAFLD的潜在分子靶标。在C57BL/6小鼠中敲除Sirt3基因后得到的Sirt3敲除小鼠在高脂饮食（HFD）诱导下表现出肝脏沉积更多的脂质，肝脏变性程度更高，总体的NAFLD进程更严重。

ESC具有什么形态学特征？它有哪些表面标志物？又该如何鉴定其分化潜能呢？请看以下分解。相对其他细胞，ESC单个细胞个体小，细胞核大，体外培养时呈集落样或克隆样生长，克隆内细胞排列紧密，细胞集落有明显的边界。此特有的形态学特征常用来做初步鉴定ESC的方法。例如，Mouse ESC细胞核大，胞核内有多个核仁，核浆比高。在贴壁生长的情况下，Human ESC集落与Mouse ESC不同，呈相对松散、扁平状集落，集落内细胞界限隐约可见。

近期，首都医科大学附属北京安贞医院杜杰/李玉琳教授团队在Circulation Research上发表了题为Variants of Focal Adhesion Scaffold Genes Cause Thoracic Aortic Aneurysm的研究论文，首次揭示了散发性iTAA基因突变的全景观，提出了一类新的TAA 致病基因，促进了对TAA遗传原因的理解。研究人员通过TesY249H基因敲入小鼠（赛业生物构建）和Tes敲除小鼠模型在体内证明TES 的功能及其在主动脉瘤发生中的作用。发现TesY249H基因敲入小鼠和Tes敲除小鼠的血管功能异常。

今天和大家见面的是高脂高胆固醇高果糖饮食诱导的NASH小鼠模型。给予动物高脂、高糖饲料喂养建立的脂肪肝模型，其主要发病机制是营养过剩，食物中脂类、胆固醇和（或）糖类过量，无法完全吸收利用，脂类堆积于肝而引发脂肪肝，进一步出现肝炎性改变及纤维化。该模型与人类非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）相似，是最常见的NAFLD动物模型。

上海交通大学医学院、上海口腔医学研究所研究人员在Advanced Science杂志发表的题为“A Magnesium-Enriched 3D Culture System that Mimics the Bone Development Microenvironment for Vascularized Bone Regeneration”的文章，发现了MagT1对血管化骨再生的特定作用，成功地构建了一个富镁3D培养系统，可以模拟骨发育微环境的血管化骨再生。

回顾上半年，赛业同样成绩斐然，赛业产品和技术服务已直接应用于包括CNS（Cell、Nature、Science）三大期刊在内的5240余篇学术论文，IF合计达20854分，文献被引用次数达25043次。赛业OriCell®提供的科研干细胞、细胞培养试剂和干细胞技术服务已帮助众多科研学者探索前沿奥秘，解决科研难题。作为细胞研究的科研工作者，不能不认识间充质干细胞（MSC）。间充质干细胞作为干细胞家族中的全能ACE担当，来源丰富，免疫原性低，收获了庞大的科研粉丝群，人气和实力不容小觑。我们来看看赛业OriCell®骨髓间充质干细胞及相关培养基如何为科研助力。

sgRNA在CRISPR-Cas9基因编辑系统中具有准确识别靶基因序列的作用，其效果可影响编辑的效率、是否发生脱靶等，甚至对最终基因编辑的效果产生决定性作用。因此，设计合理有效的sgRNA是我们实现基因编辑的重要基础。目前有较多提供gRNA设计的在线工具，常用的如张锋实验的CRISPOR（http://crispor.tefor.net/），只需输入目标序列，选定好种属基因组与相应的PAM，则可以得出多个gRNA，以及每个gRNA对应的特异性、切割效率和潜在脱靶位点，一般选择特异性、切割效率得分高的gRNA作后续实验（图4）。

亲爱的小伙伴们，你们还在为空闲的时间不知道如何利用而发愁么？你想让自己的专业更大发挥价值吗？你想让无处施展的写作才能尽情挥洒吗？你想每月拥有数量可观的零花钱吗？赛业生物长期招聘兼职写手啦~如果你是生物医药背景，乐于分享，又正好喜欢写作，那么不要浪费你的才华！更不要放过这个提升自己的好机会哦。加入我们，让我们一起不懈地努力，为关注赛业的小伙伴们带来更多有趣有料的干货文章吧。

今天我们要讲的主角是NLRP3及其突变导致的家族性冷自身炎症综合征。Nlrp3基因编码一个pyrin样蛋白，蛋白包含一个pyrin结构域，一个核苷酸结合位点(NBS)结构域和一个富亮氨酸重复序列(LRR)基序。该蛋白与凋亡相关的斑点样蛋白PYCARD/ASC相互作用，PYCARD/ASC包含一个caspase招募域，是NLRP3炎症小体复合体的成员。该复合物作为NF-kappaB信号的上游激活因子，并在炎症、免疫反应和细胞凋亡的调节中发挥作用。

军事科学院军事医学研究院生命组学研究所的张令强团队和贺福初团队联合哈佛大学医学院的魏文毅团队和中科院微生物所的刘翠华团队近日在Molecular Cell杂志上发文，解析了线性泛素化调控血管生成的新机制。为了进一步确认减弱的ALK1激酶活性是否是在E13.5观察到的胚胎致死的原因，他们还委托赛业生物构建了EC条件性敲入小鼠ALK1Q200D（小鼠ALK1的Q200D突变导致ALK1组成型激活），发现这些胚胎的存活时间显著延长。这些实验表明，Smad1/5磷酸化的增强是Otulin-null胚胎存活所必需的，而BMP9刺激或ALK1的组成型激活可延长这些胚胎的存活时间。

当我们从神经组织中分离出原代细胞，并进行纯化后，如何鉴定其中的细胞就是神经干细胞呢？无独有偶，神经干细胞也可以从形态学特征、特异性抗原表达和分化潜能三方面进行判断。神经干细胞可做悬浮培养，在生长过程中细胞呈聚球生长。从细胞形态来看，细胞团无或有较短的突起，形态上与其他种类的细胞没有明显的差异。当然，神经干细胞也可进行贴壁培养。

研究不息，探索不止，武汉大学化学与分子科学学院的研究人员介绍了一种将5fU作为多功能合成模块的新概念，有望促进生物传感器的设计和合成。他们在化学领域著名期刊Angew. Chem. Int. Ed上发表了这一研究成果。通讯作者为武汉大学化学与分子科学学院院长周翔教授，该研究中采用的小鼠胚胎干细胞和胚胎干细胞完全培养基来自赛业OriCell®。

浙江大学医学院李兰娟院士和项春生教授领导的研究团队近日开展了一项探索性临床试验，评估用间充质基质细胞（又称间充质干细胞，MSC）来治疗新冠肺炎的安全性和有效性。他们发现，间充质基质细胞不仅能够治疗新冠肺炎，未来还有望用于急性或慢性肺炎的治疗。这篇题为“对人类经血来源的间充质基质细胞治疗重症和危重症COVID-19患者的安全性和疗效的评估：一项探索性临床试验”的文章发表在《Clinical and Translational Medicine》杂志上。

今天和大家见面的是Per2基因编辑小鼠。Per2基因不仅对维持和调节生物昼夜节律具有重要作用，Per2基因的表达和节律异常改变与癌症的发生发展密切相关。对Per2基因与肿瘤发生发展的深入研究有可能为预防和治疗癌症提供新的方法和有效靶标。“红鼠资源库”可以为您提供Per2敲除小鼠研究Per2相关的疾病，而且Per2全身性以及条件性敲除活体小鼠现在正在参与秒杀，48小时内即可发货，最后两天，如有需要，欢迎联系我们咨询~

准备好了吗？模式动物巡讲—南方医科大学站再次来袭！小鼠疾病模型在转化医学研究中的应用、无菌鼠平台搭建以及相关操作。赛业生物科技集团是一家基于模式动物药物研发的国际化创新性CRO平台。依托于品系丰富的基因编辑小鼠资源库、高效且智能化的模式动物定制平台、药物筛选评价小鼠模型平台、一站式小动物表型分析平台、一站式无菌鼠技术服务平台及先进的细胞技术服务平台，建立了多位一体的创新性CRO平台服务网络，以服务于肿瘤、免疫、代谢、内分泌、心血管、神经及传染病等方向的科学研究及药物研发筛选。

为加快广州开发区数字经济产业发展，深入了解数字经济营商环境建设工作。7月22日，国务院发展研究中心调研组一行莅临赛业生物调研生物医药和智慧医疗行业工作，考察罕见病数据库的建设情况。国务院发展研究中心企业研究所研究室副主任、研究员马淑萍、国家卫生健康委医院管理研究所研究员陈校云、广州医科大学卫生政策与法学研究中心教授曾益康，广州开发区营商环境改革局等有关同志参加了此次调研座谈会。

在体外由多能干细胞生成正确分化的胚胎结构一直是一项挑战。弗吉尼亚大学的研究人员近日通过经实验设计的形态发生素（morphogen）信号中心发出的小鼠胚胎干细胞聚集指令，诱导生成了一个小鼠胚胎样实体（胚状体），这有望成为体外研究和疾病建模的强大工具。这篇题为“Construction of a mammalian embryo model from stem cells organized by a morphogen signalling centre”的文章于6月2日发表在《Nature Communications》杂志上。

基因工程人源化小鼠，包括点突变小鼠、小片段敲入和大片段基因组敲入小鼠。其中点突变及小片段敲入小鼠制备比较容易，相比之下大片段基因组人源化小鼠的制备在技术上有一定的挑战性。那么为什么要制备大片段基因组人源化小鼠？大片段基因组人源化小鼠有哪些应用？制备大片段基因组人源化小鼠有哪些技术难点？该如何突破？敬请关注7月29日（周四）晚七点赛业生物云课堂，赛业生物高级科学家欧阳应斌博士将为大家一一讲解。