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在做病毒包装实验中，科研工作者常遇到一些问题，比如为何我的LV包装出毒量很低？包装出来的LV感染细胞效率低？感染细胞后生长状态差等，下面就由赛业生物细胞生物学产品经理为大家解答这些常见的问题。为什么都是采用同样的慢病毒包装系统，别人次次成功，我的不是滴度低就是稳定性差？这是因为除了包装系统本身，LV的包装还与下列几个因素密切相关。

六月将尽，七月将至，跟着赛业一起往前走吧~赛业生物邀您参与两场学术会议。第十一届全国核糖核酸(RNA)学术讨论会将于2021年7月2日-4日在大连香格里拉酒店举办。会议由陈润生院士、施蕴渝院士、王恩多院士共同担任学术委员会主任，邀请了国内60余位核糖核酸（RNA）领域专家做学术报告和交流。会议内容涉及RNA信息学与结构生物学、RNA代谢与调控、ncRNA与医学和农学、RNA研究前沿技术等。

今天我们要讲的主角是DMD及其突变导致的遗传性疾病——杜氏肌营养不良症。DMD这种疾病最广泛使用的动物模型是30年前首次发现的肌营养不良蛋白缺陷mdx小鼠，它像DMD患者一样，在抗肌萎缩蛋白基因本身上存在突变，从而导致全功能性的肌营养不良蛋白表达减少。小鼠体内的Dmd mdx突变在23号外显子上有一个终止密码子，能够产生截短蛋白，并具有DMD的肌病理学特征；但其肌病理状态较人类病程中表现得更轻微，且可根据小鼠品系遗传背景发生改变。

荷兰阿姆斯特丹大学医学中心领导的一个国际研究团队近日在《Genetics in Medicine》杂志上发表文章，报道了KDR基因变异在法洛四联症发病中的作用。他们发现，罕见的KDR变异，特别是蛋白截短变异，与法洛四联症密切相关。未来在临床诊断中可以考虑对法洛四联症患者进行KDR筛查。在这项研究中，研究人员首先对一个摩洛哥血统的家族进行了外显子组测序，该家族有两个孩子患有严重的法洛四联症（图1）。测序结果显示两名患者携带85个非同义或剪接位点变异，而且没有一个是纯和的。由于该家族疑似隐性遗传，研究人员优先考虑双等位基因变异。两个基因包含多个罕见的变异。在对亲本中的变异进行测试后，仅剩下一组经 Sanger 测序验证的 KDR 复合杂合变异：KDR-p.(Gly345Trp)和KDR-p.(Gly537Arg)。另一个未患病的姐妹没有携带任何KDR变异。

今天和大家见面的是Fhl2基因敲除小鼠。FHL蛋白结构均含有4 个半LIM结构，这些蛋白质的定义是存在四个半富含半胱氨酸的LIM 同源域，其中半域始终位于N 端。到目前为止，FHL亚家族中有五个成员，即FHL1、FHL2、FHL3、FHL4 和人类睾丸CREM激活因子（ACT）。它们以细胞和组织特有的方式表达，并参与各种细胞过程，包括调节细胞生存、转录和信号转导。FHL1、FHL2和FHL3主要在肌肉中表达，而FHL4和FHL5仅在睾丸中表达。目前，FHL蛋白亚家族中研究最为深入的是FHL2 。

如何研究一个基因的功能呢？实现基因Loss of function，CRISPR/Cas9基因敲除和RNAi干扰表达，哪种调控方式更好？移码突变和片段敲除哪个能更好的破坏目的蛋白的功能结构域？实现基因Gain of function，过表达和基因敲入，如何选择？在构建点突变、基因敲入细胞株时，你是否难以得到点突变纯合子？敲入细胞株获得率低？细胞状态差？针对上述问题，赛业生物资深技术支持工程师沈超将结合实际研究案例，在2021年6月24日（周四）晚上7点的直播课程中为大家讲解基因功能的研究策略，以及我们该如何着手进行实验的设计和遇到问题我们该如何解决。

今天和大家见面的是Cfh基因敲除小鼠。补体因子H，又称H因子1和CFH、FH，是一种含唾液酸的糖蛋白。CFH 是血液中最丰富的补体成分之一，其中肝脏是体内CFH蛋白的主要来源。此外，CFH还由其他类型的细胞分泌，包括单核细胞、成纤维细胞或内皮细胞。该基因是补体激活调节因子RCA基因簇的成员，编码由20个短同源重复序列（SCR）构成的蛋白质。这种蛋白质被分泌到血液中，在调节补体介导的免疫系统中起着不可或缺的作用，该免疫系统参与微生物防御、免疫复合物处理和细胞程序性死亡。

“中国毒理学会神经毒理专业委员会与表观遗传毒理专业委员会2021 年联合学术年会”将于2021 年6 月19~21日在江西南昌召开。本次学术大会邀请了众多国内神经毒理学、表观遗传毒理学及相关领域专家发表演讲，旨在拓展学术视野，提供高起点、多领域的学术交流平台，呈现神经毒理学和表观遗传毒理学领域研究成果，促进中国毒理学学科发展。会议将对青年学者的口头报告、壁报进行评优、奖励。会议期间，还将举行研究生课题设计创新大赛。

“找小鼠 上红鼠”小鼠资源库涵盖16000品系基因敲除小鼠、条件性敲除小鼠及20万点突变位点小鼠品系，根据基因编辑类型可划分为CRISPR-AI敲除小鼠资源库、点突变小鼠数据库、microRNA敲除小鼠数据库三个板块，强大的数据库给您更便捷的体验，研究人员能够在线查询、设计和优化基因编辑方案并比较研究数据和成果，并咨询订购。

对于基因敲除细胞模型你可能存在许多疑惑，赛业生物细胞生物学产品经理整理了部分关于基因敲除细胞模型大家常问的问题并做出了解答。看看你的问题是否已在下面得到解答。如果你还有其他问题需要解答，欢迎联系我们。

今天我们要讲的主角是脑白质病的重要元凶——CSF1R。CSF1R中文名称为集落刺激因子1受体，也可以称为CD115，控制巨噬细胞的产生、分化以及功能。该基因的突变与乳腺癌、慢性粒细胞白血病等多种类型的癌症发生相关。在这些肿瘤的发生过程中，经常可以观察到CSF1R表达量或者功能的增加。如果从家族性的CSF1R突变角度来看，该基因的与一种遗传性神经罕见病——伴球状体遗传性弥漫性白质脑病（HDLS）具有密切相关。该基因位于人类的5号染色体上，共有24个外显子，氨基酸数量为972个。

2021年5月29日至5月31日，清华大学医学院基础医学系举办的“2021年清华大学医学院基础医学系博士生论坛”圆满落幕。会议邀请来自清华大学医学院的专家学者和博士研究生进行主题报告，共同分享研究成果，研讨基础医学和生命科学领域的新动向和新问题。赛业生物作为本次会议的钻石赞助商，有幸全程参与本次会议，共庆清华大学110周年校庆暨清华大学医学院20周年院庆。

今天和大家见面的是Il17a基因敲除小鼠。IL17A（白细胞介素17A；也称为CTLA8）是IL-17受体家族的成员，由该基因编码的蛋白质是由活化的T细胞产生的促炎细胞因子。使用IL-17RA基因敲除小鼠和IL-17A基因敲除小鼠与鼠适应流感病毒株（PR8）以及2009年流感大流行H1N1毒株进行小鼠模型研究，结果都表明IL-17A在介导急性肺损伤中起不利作用。赛业生物“红鼠资源库”可以为您提供Il17a全身性敲除小鼠和Il17a条件性敲除小鼠研究Il17a相关机制，如有需要，欢迎联系我们咨询~

研究点突变相关遗传疾病，免不了要构建细胞模型和动物模型，而我们在构建细胞点突变模型时的理论基础便是基因的同源重组修复。当细胞基因组DNA双链由于外部因素而断裂时，细胞中存在着一种DNA修复机制就会被激发，对断裂位点的DNA双链进行修复，根据修复方式的不同可分为同源重组修复和非同源重组修复。顾名思义，同源重组是指DNA在修复的过程中以同源的DNA序列作为模板完美修复，而非同源重组修复是指细胞内的相关蛋白直接将断裂的DNA两端重新连起来，同时可能会随机引入新的碱基。

今天我们要讲的主角是淋巴细胞V(D)J重排缺一不可的基因——Rag1、Rag2。Rag1和Rag2重组酶都是T、B细胞发育成熟和产生免疫球蛋白的关键蛋白。在V(D)J重排中，Rag1/2复合物参与了对RSS的识别与剪切。因此，与携带PrkdcSCID基因突变的小鼠相比，Rag1和Rag2敲除的小鼠由于其V(D)J重排通路从源头受阻。赛业生物“红鼠资源库”可以为您提供Rag1全身性敲除小鼠和Rag1条件性敲除小鼠研究Rag1相关机制，如有需要，欢迎联系我们~

作为新晋的小鼠铲屎官，你需要了解小鼠的生物学与繁殖学特性，以及一些常见的饲养繁育问题、健康问题的处理。赛业生物云课堂将持续推出系列动物健康和繁育管理课程，带你成为一个合格的铲屎官。在第一期课程中，赛业生物模式动物中心主治兽医赵佳带大家初步了解了小鼠的生物学特性与繁殖学特性，学习如何代乳、何时该换笼盒，小鼠不生该如何处理等实操知识。课程受到了各位铲屎官的热烈欢迎，可扫描下方二维码直接观看。

中科院动物所李卫研究员与山东大学陈子江院士团队近日在《The EMBO Journal》上发表了题为“Paternal USP26 mutations raise Klinefelter syndrome risk in the offspring of mice and humans”的文章，首次发现并证实了父源USP26突变可增加子代的克氏综合征风险。Usp26-/Y睾丸中的TEX11水平显著降低，支持了USP26介导的去泛素化促进了TEX11的稳定性。Usp26敲除后TEX11水平降低，导致性染色体无法正常配对联合（Usp26敲除小鼠（2664bp）和Tex11敲除小鼠由赛业生物构建）。

今天和大家见面的是Sirt3基因敲除小鼠。SIRT3是哺乳动物sirtuin蛋白家族的成员，表现出NAD+依赖性脱乙酰酶活性。人类sirtuins具有一系列分子功能，并已成为衰老，抗逆性和代谢调节中的重要蛋白质。除了蛋白质脱乙酰化之外，研究表明人类sirtuin还可以作为具有单ADP核糖基转移酶活性的细胞内调节蛋白起作用。三种sirtuins，SIRT3，SIRT4和SIRT5，位于线粒体中，并参与调节代谢过程。内源性SIRT3是位于线粒体基质中的可溶性蛋白质，有大量已发表的文献表明线粒体功能，衰老和致癌作用之间存在强大的机制联系。

慢病毒是逆转录病毒的一种，通过长时间的潜伏它能在宿主体内引起慢性致死性疾病。同时，它的宿主的分布范围非常广，包括人类和其他的哺乳动物。实验室使用的慢病毒本质上来说是一种载体，虽然也是病毒颗粒，但它是没有自我复制功能的。目前慢病毒包装系统已经发展到了第三代包装系统，这个包装系统还有4个质粒，也就是1个目的基因载体，3个辅助质粒。赛业生物提供的慢病毒、腺病毒、腺相关病毒包装服务，从病毒滴度、纯度、活性等方面确保病毒包装质量的可靠性，广泛应用到各种细胞模型的构建、活体动物的体内注射、基因治疗等研究领域中，且被多篇文献引用报道。

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，以保存细胞活力，也起到了细胞保种的作用。为什么要让细胞化身睡美人？让细胞乖乖冻存前该准备哪些必要工作？小心翼翼冻存的细胞，复苏后却生长状态不好，容易挂？细胞冻存试剂仪器太贵，心好累？关于细胞冻存的那些事，尽在6月17日（周四）晚上7点赛业云课堂，赛业OriCell细胞生物学研发主管毕老师将为大家全面解析细胞冻存。