上周三，赛业生物肿瘤药效部研发科学家朱金娥为大家主讲「原位移植和转移性肿瘤模型的构建及应用」线上课程，以下为本次直播常见问题汇总与解答。

 

FAQ:

1.如何用MC38小鼠建立结直肠癌肝转移模型？

2.皮下成瘤实验可以用普通小鼠做吗？

3.原位移植肿瘤均一性的影响因素？

4.原位移植的成功率受什么影响？

5.原位移植和转移性肿瘤模型的相关应用场景？

6.可以介绍一下食管癌相关的原位癌吗？

 

 

Q.如何用MC38小鼠建立结直肠癌肝转移模型？

肝转移肿瘤转移模型模拟临床中肿瘤切除术后癌细胞回流入门静脉至肝脏血道播散而发生肝转移的过程。

 

下面的案例是用脾脏注射的手术方法构建的C57BL/6小鼠MC38-luc结直肠癌肝转移模型。
 

MC38 -Luc小鼠结肠癌细胞脾脏注射的肝转移肿瘤转移模型

 

1.细胞接种量及稀释：每只C57BL/6小鼠注射50μL含有1×10⁶个MC38 -Luc细胞的细胞悬液。

 

2.脾脏器官较薄，需沿着脾脏平行进针，防止针口戳穿脾脏，脾脏中血管丰富，注射后需多按压一段时间，防止血液外渗造成小鼠大量失血而死亡，或者注射到脾脏的肿瘤细胞外渗。注射结束后，结扎脾脏血管，最后摘除脾脏。

 

Q.皮下成瘤实验可以用普通小鼠做吗？

 

A .需要根据肿瘤源来选取小鼠，人源的肿瘤细胞和肿瘤组织块都需要用免疫缺陷小鼠进行皮下移植模型构建。鼠源细胞需要用相同背景鼠进行模型构建。

 

Q.原位移植肿瘤均一性的影响因素？

 

A .有以下几个影响因素：细胞活性，细胞悬液均一度，注射体积的均一性，荧光信号均一性。

 

Q.原位移植的成功率受什么影响？

 

A .影响因素：麻醉风险，位点手术风险，技术能力，人工误差，细胞特性等不同程度地影响原位移植的成功率。

 

Q.原位移植和转移性肿瘤模型的相关应用场景？

 

A.

1.研究肿瘤发生和转移的机制。

2.筛选和评价抗肿瘤药物的药效。

 

Q.可以介绍一下食管癌相关的原位癌吗？

Kyse150-luc人食管癌细胞下食道食管癌原位模型:
 

1. 细胞接种量及稀释：每只C-NKG小鼠注射10μL含有0.5×10⁶个Kyse150-luc细胞的细胞悬液（用PBS和基质胶混合的重悬液） 。

 

2. 接种在腹腔胃连接处的下食道浆膜层内接种细胞。

 

3. 下食道浆膜层在肌肉作用下容易将未凝固的细胞团液体挤出浆膜层滑进腹腔，需要特殊用血管夹夹住食道，等待基质胶凝固。

 

4. 建模成功率在80%。需要增加富余量20%-30%左右。

 

5. 此次建模使用C-NKG小鼠，可以使用缺陷小鼠类型： BALB/C nude；NOD/SCID；C-NKG。