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限时1.75万|KO细胞总动员,使用RNP递送,实现超低脱靶效率

人阅读 发布时间:2023-03-17 15:58

作为实现基因loss of function的重要调控方式,基因敲除(Knock out, KO)可完全消除目的基因的表达,使其蛋白完全不表达或功能彻底丧失,且可以更好地观察细胞表型的变化。但KO细胞株构建过程较为繁琐,实验周期长,且容易出现敲除效果不彻底的情况,导致研究进度受阻。

 

基于Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,赛业生物能提供KO细胞株构建服务,轻松实现快至4周交付。我们使用优化的转染体系将RNP(gRNA和Cas9蛋白复合物)直接递送到细胞内,相比于质粒和病毒等CRISPR/Cas9介导的方法,脱靶效率降低明显,能更精准地切割目标DNA序列。即日起至4月10日,订购以下特价细胞的基因敲除项目均可享受1.75万的优惠价格。

 

特价KO细胞株

 

特价KO细胞株列表(部分精选)

 

体内体外基因编辑平台优势

 

独有Smart-CRISPR™技术

拥有全新升级的Smart-CRISPR™细胞基因编辑系统,轻松实现基因敲除、基因敲入等多种策略,编辑效率高达90%。

 

采用RNP递送,脱靶效率低

相比于质粒或者病毒等基因敲除方法,RNP递送具有更高的特异性和编辑效率,准确靶向目的细胞,实现Cell pool/纯合子交付,快至4周。

 

成熟的技术平台

从体内动物实验到体外细胞实验,拥有上万例成功基因编辑项目经验、超200种细胞株成功案例和多篇文献引用发表,可提供从细胞基因表达调控、细胞功能验证、小鼠疾病模型构建及表型分析的全流程服务。

 

严格的质量控制体系

进行细菌、支原体等微生物的双重检测,确保100%无污染,并充分鉴定基因编辑效果;进行细胞活率检测,保证交付质量。

 

专业的项目管理

24h内即可出方案,定期反馈项目进展,配备博士团队予以技术支持,提供详尽的交付报告,可根据要求交付不同克隆(纯合子、杂合子和对照)细胞。

 

服务案例

体外敲除HIF-1α基因以验证其调控机制

Di-(2-ethylhexyl) phthalate exposure leads to ferroptosis via the HIF-1α/HO-1 signaling pathway in mouse testes.

 

研究人员构建了HIF-1α基因敲除的Leydig和Sertoli细胞系(由赛业生物提供),通过Sanger测序和Western blotting检测,确认了敲除细胞系中的HIF-1α被成功敲除。与野生型细胞相比,HIF-1α-KO细胞系在MEHP刺激下细胞活力受损的程度有明显改善。同时,脂质过氧化和亚铁超载也受到抑制。分别使用qPCR和Western印迹法评估Hmox1和HO-1水平的表达,发现敲除Hif-1α能逆转MEHP刺激下的Hmox1和HO-1表达水平上调。此外,MEHP刺激后ROS爆发和细胞死亡程度也在敲除HIF-1α后减弱。Western印迹显示敲除HIF-1α恢复了ACSL4、FTH1和SLC7A11的表达,以及抑制GPX4的表达。由此表明,MEHP刺激以HIF-1α依赖的方式导致睾丸Leydig和Sertoli细胞的铁死亡。

 

KO细胞

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